摘要 5' 前導區域的移除是生命所有領域中 tRNA 分子成熟的重要步驟

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• 類型：已發表論文
• 日期：2024-03-12

摘要

5'-前導區域的移除是生命所有領域中 tRNA 分子成熟的重要步驟。該反應由各種 RNase P 活性催化，範圍從具有核酶活性的核糖核蛋白到僅蛋白質形式。在大腸桿菌中，RNase P 介導的切割效率可以透過計算設計的核糖開關元件以配體依賴性方式控制，其中 tRNA 前體的 5'-前導序列要么隔離在髮夾結構中，要么呈現為易於成熟的單鏈區域。在目前的工作中，這種人工構建體的調節潛力在不同形式的真核生物 RNase P 酶上進行了測試——來自擬南芥的兩種純蛋白質 RNase P 酶（PRORP1 和 PRORP2）和智人的核糖核蛋白。在細菌 RNase P 互補系統中對 PRORP 酶進行了體外和體內分析。我們也在 HEK293T 細胞中測試了核糖開關是否對人類核 RNase P 保持功能。雖然合成核糖開關的調節原理適用於所有測試的 RNase P 酶，但結果也顯示了各個酶版本的底物要求的差異。因此，這種設計的 RNase P 核糖開關代表了一種新工具，用於研究 5'-前導序列的結構組成對不同類型 RNase P 酶底物辨識的影響。