摘要 CRISPR Cas9 已經產生了大量的效應子，包括標靶轉錄活化子、鹼基編輯器和初等編輯器

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• 類型：已發表論文
• 日期：2024-03-12

摘要

CRISPR-Cas9 已經產生了大量的效應子，包括標靶轉錄活化子、鹼基編輯器和初等編輯器。目前誘導調節 Cas9 活性的方法缺乏時間精度，需要廣泛的篩選和最佳化。我們描述了一種多功能、化學控制且快速激活的單組分 DNA 結合 Cas9 開關 ciCas9，我們用它來賦予對七個 Cas9 效應器的時間控制，包括兩個胞苷鹼基編輯器、兩個腺嘌呤鹼基編輯器、一個雙鹼基編輯器、一個主編輯器和一個轉錄激活器。使用這些時間控制的效應器，我們分析了鹼基編輯動力學，表明編輯在數小時內發生，並且核苷酸的快速早期編輯預測了最終的編輯幅度。我們也發現，對目標位點內的首選核苷酸進行編輯會增加旁觀者編輯的頻率。因此，ciCas9 開關提供了一種簡單、通用的方法來產生化學控制的 Cas9 效應器，為未來的效應器工程提供信息，並為動力學研究提供精確的時間效應器控制。